迈尔斯·莫拉莱斯的生活因为一次意外变得复杂。他被一只放射性蜘蛛咬伤，并因此获得了毒液冲击、伪装隐藏、蜘蛛爬行、超凡听力、蜘蛛感应等一系列超能力。与此同时，这座城市里最臭名昭著的犯罪头目金并已经建立起一台高度隐秘的超级对撞机，这台对撞机开启了通往其他宇宙的时空通道，来自其他宇宙、不同版本的蜘蛛侠也来到了迈尔斯所在的世界。迈尔斯和从其它平行宇宙中穿越而来的蜘蛛侠彼得·B·帕克、女蜘蛛侠格温·史黛西、暗影蜘蛛侠、日系少女蜘蛛侠潘妮·帕克和蜘猪侠六位蜘蛛侠首次集结成团，共同对抗蜘蛛侠宇宙最强反派。